波尔山羊精液保存影响因素的探讨.doc

波尔山羊精液保存影响因素的探讨 陈家振 为了推行波尔山羊的统一供精，延长波尔山羊人工授精过程中精液的保存时间，我们在波尔波尔山羊改良过程中，在丰县梁寨镇合作种羊场进行了波尔山羊精液的高倍稀释、常温保存、冷冻技术及授精效果的系列研究，对波尔山羊精液保存若干影响因素进行了探讨，现将结果报告如下。 1 精液的处理 波尔山羊精液采集后，往往由于处理不当而缩短精子的保存时间。为此，我们选用5只公波尔山羊连续采精55天，采用4种不同处理方法，借以寻求延长精子保存时间的有效途径。 1.1不同稀释倍数对精子存活的影响 取活力0.83，密度每毫升20.6亿，PH值6.6的精液进行1∶2、1∶10、1∶20倍稀释（稀释液为：乳糖3克、葡萄糖2克、柠檬酸三钠1克，蒸馏水100毫升，青、链霉素各10万单位），置于14-16℃的井水中保存，间隔8小时检查活力，经6次重复，结果0.3级保存时数分别为51、46、37.5小时，精子存活指数分别为45.3、35.2、17.6，以1∶2保存效果最好。 1.2不同保存温度对精子存活的影响 取活力0.8，密度每毫升21.3亿，稀释后进行常温（14-16℃）、低温（2-5℃）、超低温（―196℃）保存，间隔8小时检查活力，经4次重复，结果14-16℃的0.3级保存时数为48小时，精子存活指数为32.3。2-5℃的0.3级保存时数为64小时，精子存活指数为55.2，说明2-5℃的保存效果较好（P0.05）。 2 稀释液的筛选 2.1 不同配方对精子存活的影响 A配方为：葡萄糖5克、柠檬酸钠0.3克、乙二安四乙酸二钠0.1克。B配方为：乳糖5克、葡萄糖3克、柠檬酸钠1.5克。以上两配方均用蒸馏水100毫升溶解，过滤、清毒后分别加入青、链霉素各10万单位。利用A、B配方按10倍稀释波尔山羊精液在14-16℃的条件下进行保存试验。结果0.3级保存时数A配方为27小时，B 配方为57小时。精子存活指数A 配方为19.6，B配方为36.3，以B 配方效果最佳（P0.05）。保存23-25小时时，B配方的受胎率极显著地高于A 配方（P<0.01），结果见表。 不同稀释液配种受胎及产羔效果 单位：小时、只、% 稀释液代号 精液存放时间 配种只数 受胎只数 受胎率 平均产羔数 A配方 12—14 42 34 80.95 1.81 23—25 30 14 46.67 1.79 B 配方 12—14 50 42 84.00 1.97 23—25 51 40 78.43 1.88 3.3 不同稀释冷冻颗粒的受胎效果 分别用A配方和B配方（另加卵黄20毫升、甘油5毫升）制作冷冻颗粒，经45-60℃水浴快速解冻。每羊输入1颗粒，结果A配方的受胎率为47.27%（26/55），B配方的受胎率为71.45%（786/1100），两配方受胎率比较差异极显著（P0.05）。 4 讨论与分析 4.1 精液保存时，稀释倍数以1∶2-10为宜，稀释倍数过高随着保存时间的延长，往往会造成精液的沉淀，缩短精液的保存时间。采用高倍稀释输精时，可采取二次稀释法。 4.2 在低温保存波尔山羊精液时，应采取等温稀释，逐渐降温的方法，防止突然降温造成精子冷休克。在稀释液中加入10-20%的新鲜卵黄，可使低温条件下精液的保存时间延长。 4.3 在波尔山羊精液保存过程中，PH值往往会发生一定的波动，使保存效果发生变化，应注意PH值的测定，并及时进行调整。 4.4 进行波尔山羊精液高倍稀释输精时，我们将输精剂量由常规的0.1-0.2毫升提高到0.4毫升，子宫颈口输精改为阴道输精，同样保证了较高的受胎率。